Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶分子量較小．一般在 20~40kDa，通常由（）亞基所組成。它們的作用底物為雙鏈 DNA，極少數(shù)Ⅱ類酶也可作用于單鏈 DNA，或 DNA／RNA 雜合鏈。這類酶的專一性強(qiáng)，它不僅對酶切點(diǎn)鄰近的兩個堿基有嚴(yán)格要求，而且對更遠(yuǎn)的堿基也有要求，因此，Ⅱ類酶既具有（）專一性，也具有（）的專一性，一般在識別序列內(nèi)切割。切割的方式有（），產(chǎn)生（）末端的DNA片段或（）的DNA片段。作用時(shí)需要（）作輔助因子，但不需要（）和（）。